關(guān)于大鼠ELISA試劑盒的標本處理 你需要知道的幾點
點擊次數(shù):714 更新時間:2019-01-10
大鼠ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體水平。用純化的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體,再與HRP標記的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體濃度。
關(guān)于
大鼠ELISA試劑盒的標本處理,您需要知道下列這幾點:
1、本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
2、實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,如果標本濃度過高,應(yīng)對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3、若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
4、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結(jié)果偏差。
5、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
6、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。
7、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
大鼠elisa試劑盒所具有的高特異性優(yōu)勢有哪些呢?
1. 特異性:指大鼠elisa試劑盒正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的才干(無假陽性),取決于包被抗原(體)及符號抗原(體)的純度及特異性。
2. 安穩(wěn)性:大鼠elisa試劑盒在規(guī)則條件下能儲存的時間,一般選用破壞性實驗行將試劑存放于37℃保存,定時測定其靈敏度,特異性和精密度等方針,直到其質(zhì)量方針開端下降中止,一般認為37℃每安穩(wěn)一天相當于4-10℃保存一個半月。
3. 簡便性:
大鼠elisa試劑盒指在不影響試劑的前三項方針的前題下,實驗和測定過程越少越好,在定性實驗中成果判別簡略明晰,定量實驗成果核算也應(yīng)簡略。 受方法學及技術(shù)條件的約束,在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)必定的非特異性,咱們可以通過以上辦法把非特異性顯色降至至低限底,然后前進檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗成果。